离心技术在生物科学,特别是在生物化学和分子生物学研究领域,已得到十分广泛的应用,每个生物化学和分子生物学实验室都要装备多种型式的离心机。离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(细胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离,而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度。
离心机的基本原理:
当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时,此离心力“F”由
下式定义,即:
F = m&S226;a = m&S226;ω2 r
a — 粒子旋转的加速度,
m — 沉降粒子的有效质量,
ω—粒子旋转的角速度,
r—粒子的旋转半径( cm )。
通常离心力常用地球引力的倍数来表示,因而称为相对离心力 “ RCF ”。或者用数字乘“g”来表示,例如 25000×g,则表示相对离心力为 25000。相对离心力是指在离心场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g” (980cm/sec2),此时“RCF”相对离心力可用下式计算:
RCF = 1.1 ∴ 19×10-5×(rpm)2 r
( rpm — revolutions per minute 每分钟转数,r/min )
由上式可见,只要给出旋转半径 r,则 RCF 和 rpm 之间可以相互换算。但是由于转头的形状及结构的差异,使每台离心机的离心管,从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不一样的,所以在计算是规定旋转半径均用平均半径“ra v”代替:
ra v=( r min+rmax) / 2
一般情况下,低速离心时常以转速“rpm”来表示,高速离心时则以“g” 表示。计算颗粒的相对离心力时,应注意离心管与旋转轴中心的距离“r”不同,即沉降颗粒在离心管中所处位置不同,则所受离心力也不同。因此在报告超离心条件时,通常总是用地心引力的倍数“×g”代替每分钟转数“rpm”,因为它可以真实地反映颗粒在离心管内不同位置的离心力及其动态变化。科技文献中离心力的数据通常是指其平均值(RCFa v),即离心管中点的离心力。
单位 rpm 与 g 的换算: